增強(qiáng)型ATP檢測(cè)試劑盒(Enhanced ATP Assay Kit)可以用于檢測(cè)普通溶液、細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。細(xì)胞和組織樣品一步裂解即可完成樣品制備，檢測(cè)靈敏度高達(dá)0.1nM，化學(xué)發(fā)光可以持續(xù)穩(wěn)定達(dá)30分鐘。本試劑盒的多項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于許多國(guó)外的同類(lèi)產(chǎn)品。并且獲得的樣品還可以同時(shí)進(jìn)行Western檢測(cè)。
ATP，作為最重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP水平的改變，會(huì)影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會(huì)下降；而高葡萄糖刺激等可上調(diào)某些細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線(xiàn)粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時(shí)ATP水平的下降通常和線(xiàn)粒體的膜電位下降同時(shí)發(fā)生。
本試劑盒根據(jù)螢火蟲(chóng)螢光素酶(firefly luciferase，也稱(chēng)熒光素酶)催化螢光素產(chǎn)生螢光時(shí)需要ATP提供能量研制而成。當(dāng)螢火蟲(chóng)螢光素酶和螢光素都過(guò)量時(shí)，在一定的濃度范圍內(nèi)螢光的產(chǎn)生和ATP的濃度成正比。這樣就可以高靈敏地檢測(cè)溶液中的ATP濃度。
樣品制備簡(jiǎn)單。本試劑盒提供了可以用于細(xì)胞和組織裂解的ATP檢測(cè)裂解液，簡(jiǎn)單裂解后即可用于ATP檢測(cè)。無(wú)需進(jìn)行高氯酸或(TCA)抽提，或樣品裂解后的煮沸等繁瑣操作。
靈敏度高，線(xiàn)性范圍寬，在0.1nM至10μM范圍內(nèi)有良好檢測(cè)效果。本試劑盒在樣品體積為100微升時(shí)可以檢測(cè)濃度低達(dá)0.1nM的ATP。而常規(guī)的細(xì)胞或組織裂解液中ATP的濃度為0.1-1μM，一些常見(jiàn)細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平約為10nmol/mg蛋白。并且本試劑盒的檢測(cè)濃度范圍非常寬，檢測(cè)上限可以高達(dá)10μM，并在0.1nM-10μM范圍內(nèi)可以形成良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
讀數(shù)穩(wěn)定。本試劑盒進(jìn)行了特殊的優(yōu)化設(shè)計(jì)，使檢測(cè)ATP時(shí)的化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定。對(duì)于ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的檢測(cè)結(jié)果顯示，在開(kāi)始反應(yīng)后10分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光無(wú)明顯下降，開(kāi)始反應(yīng)后30分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光的下降不超過(guò)10%。
制備的樣品兼容性好。使用本試劑盒中的ATP檢測(cè)裂解液裂解獲得的細(xì)胞或組織樣品，不僅可以用于ATP檢測(cè)，還可用于檢測(cè)蛋白濃度、進(jìn)行SDS-PAGE或一些常規(guī)的較易溶解蛋白的Western檢測(cè)。

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