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冰凍切片包埋劑制備注意事項(xiàng)
  • 發(fā)布日期:2024-07-01      瀏覽次數(shù):1030
    • 操作步驟
      1、冰凍制片組織常規(guī)取材。
      2、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分。
      3、在冷凍切片機(jī)里預(yù)冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑。
      4、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。
      5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃),待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘。
      6、將組織托夾入切片夾頭,進(jìn)行切片。
      7、切片完成后可將組織托置于室溫下 3-5 分鐘解凍后變軟,用水將包埋劑沖洗干凈。
      8、將組織放入包埋盒,浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進(jìn)行組織固定。


      結(jié)果
      1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織,冷凍后包埋劑和組織變白,硬度適宜,切片平整。
      2、包埋效果不良:包埋劑過多導(dǎo)致溢出組織托外圍、包埋劑過少不能有效支撐組織或冷凍錘溫度不夠低導(dǎo)致冷凍速度過慢引起組織偏軟,不能切片。


      注意
      1、冷凍切片組織包埋劑到達(dá)最佳切片硬度所要求的溫度區(qū)間為-10℃ - -30℃,溫度過高質(zhì)軟不能切片,溫度過低切片會出現(xiàn)碎裂現(xiàn)象。
      2、組織脫水前需要將組織表面殘留的冷凍切片組織包埋劑充分洗凈,避免包埋劑進(jìn)入脫水流程。
      3、冷凍切片貼片固定后不水洗就進(jìn)入蘇木素染色流程,切片中殘留包埋劑將會與蘇木素染色液結(jié)合,出現(xiàn)非特異性蘇木素染色。


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