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01 為什么要進行細胞體外培養(yǎng)

社會上習(xí)慣于把科學(xué)和技術(shù)連在一起，統(tǒng)稱為科學(xué)技術(shù)，簡稱科技?？茖W(xué)解決理論問題，技術(shù)解決實際問題。我們走向更好的生活現(xiàn)代生物技術(shù)一般認為包括基因工程技術(shù)、細胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關(guān)系。醫(yī)藥領(lǐng)域（基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細胞培養(yǎng)來實現(xiàn)）、基因工程（乙肝疫苗很多是以 CHO 細胞作為載體）、細胞工程（雜交瘤單克隆抗體，是通過細胞培養(yǎng)來實現(xiàn)），既使是現(xiàn)在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開細胞培養(yǎng)；正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經(jīng)過細胞培養(yǎng)過程才能實現(xiàn)，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細胞培養(yǎng)密切相關(guān)。

總之,細胞培養(yǎng)在整個生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。

02 細胞培養(yǎng)基本概念

細胞培養(yǎng)
將活細胞（尤其是分散的細胞）在體外進行培養(yǎng)的方法稱為細胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離（散）細胞培養(yǎng)，廣義的還包括單（個）細胞培養(yǎng)又稱克隆，是指單個細胞通過有絲分裂形成的細胞群體。

原代細胞
初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割，任其生長繁殖而不更換生長器皿。
 傳代培養(yǎng)
隨著培養(yǎng)時間的延長、細胞不斷分裂繁殖，細胞之間相互接觸會發(fā)生接觸性抑制，生長速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營養(yǎng)物逐漸不足，代謝產(chǎn)物不斷累積，不利于細胞繼續(xù)生長。在這種情況下，需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接到培養(yǎng)器皿中進行再培養(yǎng)。
 細胞系
原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)后所繁殖的細胞群體。狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義的是指可傳代的細胞。正常細胞通常只能分裂有限的次數(shù)，隨后就會喪失增殖的能力，這是一個由遺傳決定的事件，被稱為衰老。這種細胞系被稱為有限細胞系；一些細胞系會通過轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约毎?，這一過程可自然發(fā)生，也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后就成為連續(xù)細胞系。
 

03 細胞培養(yǎng)的環(huán)境

細胞培養(yǎng)實驗室的主要要求是時時維持細胞培養(yǎng)工作區(qū)域處于無菌狀態(tài)，獲得無菌條件經(jīng)濟的方式就是使用細胞培養(yǎng)超凈臺。細胞培養(yǎng)超凈臺應(yīng)足夠一人使用，內(nèi)外部均采用易清潔設(shè)計，具有充足的照明，使用舒適。使用過程中需保持細胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)工作空間整潔有序，將所有物品放在直視范圍內(nèi)，便于取用。使用前向放入細胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)的物品噴灑70%的乙醇，擦拭清潔，進行消毒。

細胞培養(yǎng)通超凈臺的物品擺放一般遵循以下右手使用習(xí)慣，可根據(jù)特殊實驗中增加的物品進行相應(yīng)的適當改動。